Objetivos
1
Preparación de resta de
calibrado midiendo la absorbancia a 650 nm de soluciones patrón
2
Medición de muestra problema
Fundamento
Las partículas cuando interaccionan con un haz de
luz tienen la capacidad de absorber la energía y se excita. Los cambios
producidos en la partícula dependerán de la naturaleza de la propia partícula y
de la energía de la luz incidente.
Los espectros de absorción por tanto son de
utilidad para seleccionar la longitud de onda más adecuada para una medición de
una sustancia determinada.
La relación entre la luz incidente y la luz
transmitida se denomina: Transmitancia. (T)
T= Luz transmitida(ls) %T= ls x 100
Luz incidente (lo) lo
En la práctica se utiliza el
valor de absorbancia en lugar de transmitancia:
A = 2 · log(%T)
La relación matemática entre
la absorbancia y el porcentaje de transmitancia es el siguiente:
El %T va de 0 hasta 100; si
el %T = 100 entonces A=0
La A va de infinito a 0; si
el %T = 0 entonces A = infinito
Para evitar la interacción
por parte del disolvente o de la cubeta se hace una medida previa que será el
blanco para eliminar dichas interferencias. Todas las medidas que se hagan con
posterioridad serán referidas a esta medida inicial y se deben hacer en la
misma cubeta que el blanco.
LEY DE LAMBERT-BEER
Establece la relación entre
la A de una solución y la concentración de sustancia absorbente y la longitud
que recorre la luz a través de la solución.
A:
Absorbancia
A = ε
· c · l → ε: Coeficiente de extinción molar (mol · cm)
c:
Concentración del absorbente (M)
l
: Longitud del paso de luz (cm)
La l longitud
dependerá de la cubeta que vamos a usar, en nuestro caso, siempre va a ser 1cm,
por eso es despreciable.
El ε (coeficiente
de extinción molar) es una constante de una sustancia siempre que no se varien
las condiciones de longitud de onda, pH, Tª, etc... Como siempre vamos a
comparar la misma sustancia es despreciable.
El único parámetro que nos
interesa entonces es la c (concentración del absorbente).
La ley de Lambert-Beer se
cumple para soluciones diluidas ya que con valores de aconcetración altos,ε varia debido a fenómenos
de dispersión de la luz, agregación de moléculas, etc...
PARTES DE UN ESPECTROFOTÓMETRO:
1- Lámpara.
2- Rendija de entrada.
3- Rejilla de difracción o prisma.
4- Rendija de salida o monocromador.
5- Cubeta. Suele ser de 1cm²
6- Sensor o detector.
7- Pantalla Digital.
Reactivos
HSO4
BaCl2
Materiales
2
vasos de precipitado
3
pipetas de 10ml
Cristal
de reloj
Pipeteador
Embudo
Probeta
Procedimiento
1
Se realiza la preparación de
la disolución madre de BaCl2 0,0962 N y disolución madre de HSO4 0,2 N necesarias para realizar las muestras
2
Se toman 6 tubos de ensayos
en una gradilla y se enumeran para evitar errores a la hora de la medición.
3
Añadimos en el primer tubo
6ml de H2O destilada, la cual nos servirá para el calibrado o el cálculo blanco.
4
Procedemos a realizar las
muestras restantes a diferentes concentraciones y por último 6 ml de HSO4
5
También realizamos dos tubos
en las que añadimos el agua de muestra
6
Cuando tenemos todas las
muestras para medir, procedemos a ir al espectrofotómetro.
7 El espectrofotómetro se
enciende y deja un rato para que realice los procesos de autocalibrado y
calibramos a absorbancia 650nm
8
Se ponen las muestras
anteriormente realizadas siempre con la primera de medición en blanco y luego
en orden aparente de turbidez que presenten, para intentar lo mínimo posible
contaminar las demás mediciones.
Cálculos
-BaCl2 0,0962 N 100ml
-H2SO4 0,2 N 100ml, 96% pureza, d=1,84g/cm3
N=M.V
0,0962=M.2
M=0,0481
M= nº
de moles 0,0481= m/208
=m= 0,99g NaOH
Vdisolución (L)
0,1L
N=M.V
0,2=M.2
M= 0,1
M= nº
de moles 0,1= m/98
=m= 0,98g NaOH
Vdisolución (L)
0,1L
100g ____________________ 96% H2SO4
X______________________ 0,98g " X= 1,02g H2SO4
V D 1,84
1
|
2
|
3
|
4
|
|
BaCl2
|
0
|
5,2ml
|
5,6ml
|
5,8ml
|
H2SO4
|
0
|
0,8ml
|
0,4ml
|
0,2ml
|
Agua
Dest.
|
6ml
|
0
|
0
|
0
|
